Otopina hematoksilina

Hematoksilin se obično koristi u kombinaciji s eozinom za bojenje tj. bojenje HE. Hematoksilin se oksidira kako bi se proizveo hematoksilin, osnovna boja koja se koristi u histologiji za bojenje staničnih jezgri. Osnovno načelo bojenja je da je DNK, glavna komponenta kromatina u jezgri, negativno nabijena i kisela, te se lako može obojiti kombiniranjem s alkalnom, pozitivno nabijenom hematoksilinskom bojom.

Ova boja hematoksilinom, koncentracija hematoksilina 0,5%, može se koristiti s bojom eozinom (G1001 ili G1002) za HE bojenje tkiva ili stanica, a obojene jezgre su izrazito plave ili plavo-ljubičaste.

Skladištenje i transport na sobnoj temperaturi, rok trajanja 18 mjeseci.

Pripremite vlastitu otopinu za frakcioniranje hematoksilina (preporučeno G1039), otopinu hematoksilina reblue (preporučeno G1040), ksilen, gradijent etanola, bezvodni etanol i neutralnu gumu.

1. Predobrada uzorka

(1) Za parafinske rezove: rezovi se deparafiniraju u ksilenu 10 minuta, zamjenjuju svježim ksilolom 10 minuta, bezvodnim etanolom 5 minuta, svježim bezvodnim etanolom 5 minuta, 90% etanolom 5 minuta, 75% etanolom 5 minuta , i oprati vodom iz slavine.

(2) Za smrznute dijelove: Zamrznute dijelove pohranjene na -20 stupnjeva potrebno je odmarati 5-10 min da se povrate na sobnu temperaturu.

2. Bojenje hematoksilinom

Gore tretirani dijelovi izravno su obojeni u otopinu za bojenje hematoksilinom 3-5 min i isprani vodom iz slavine; zatim obojen otopinom za diferencijaciju hematoksilina 2-5 s i ispran vodom iz slavine; hematoksilin replava otopina 2-5 s i isprana vodom iz slavine. Uočeno je da su jezgre pod mikroskopom plave, a pozadina tkiva bila je gotovo bezbojna. Sekcije su zatim dehidrirane uzastopno pomoću 70%, 80%, 95% i 100% etanola oko 3 minute svaka. Sekcije su zatim dehidrirane u svježem bezvodnom etanolu 3 minute, prozirne u ksilenu 5 minuta i zamijenjene svježim ksilenom još 5 minuta. Na kraju, sekcije su zapečaćene neutralnom gumom.

Napomena: Ako se koristi za ponovno bojenje nakon imunohistokemije i drugog bojenja, izvedite bojenje eozinom nakon završetka drugog bojenja.

1. Otopina za bojenje hematoksilinom može se ponovno upotrijebiti nekoliko puta i treba je pohraniti u zatvorenu posudu nakon svake uporabe kako bi se spriječilo isparavanje aktivnih sastojaka. Kada je obojenje tkiva ili stanica očito svijetlo ili nenormalno, zamijenite otopinu za bojenje novom.

2. Mala količina oksidnog filma na površini mrlje je normalna i ne utječe na rezultat bojenja. Ako se na površini otopine za bojenje pojavi velika količina oksidnog filma, preporuča se promijeniti otopinu za bojenje s hematoksilinom.

3. Molimo nosite laboratorijsku kutu i jednokratne rukavice tijekom rada.

Samo za istraživačku upotrebu

Popularni tagovi: otopina hematoksilina, Kina proizvođači otopine hematoksilina, dobavljači, tvornica