Swe rekombinantna otopina Tripsin-EDTA bez fenola crvenog

Tripsin je serin hidrolaza koja može odrezati karboksilni kraj lizina i arginina u polipeptidnim lancima. Tripsin se koristi u ekstrakciji stanica tkiva, kulturi i in vitro kulturi stanica za hidrolizu međustaničnih proteina i rastavljanje tkiva ili stanica u pojedinačne stanice. Konvencionalni tripsin dobiva se iz gušterače životinja poput svinja i krava. Podrijetlo konvencionalnih enzima gušterače i karakteristike proizvodnog procesa znače da oni neizbježno sadrže nečistoće životinjskog podrijetla i potencijalnu virusnu kontaminaciju. Ovaj proizvod koristi rekombinantni svinjski tripsin kako bi zamijenio konvencionalni tripsin. U procesu proizvodnje ne koriste se sirovine životinjskog podrijetla, a čistoća i održivost rekombinantnog svinjskog tripsina osigurana je kroz više krugova pročišćavanja. To mu omogućuje ne samo da zamijeni funkciju konvencionalnog tripsina, već i da se koristi za probavu posebnih stanica ili tkiva gdje se strogo zahtijeva životinjsko podrijetlo. Dodatno proizvod sadrži EDTA, bez indikatora fenol crveno.

Brod s mokrim ledom; Čuvati na 4 stupnja daleko od svjetlosti 12 mjeseci. Ako se proizvod ne koristi kraće vrijeme, preporučuje se čuvanje na -20 stupnjeva dulje vrijeme.

Napomena: Sljedeći protokoli se uglavnom koriste za adherentne stanice. Za probavu tkiva, tkivo je najprije potrebno izrezati na odgovarajuće veličine. Vrijeme potrebno za probavu uvelike varira od tkiva do tkiva, a obično je preporučljivo da se tkiva nakon probave dovoljno razbiju.

1. Uklonite izvorni medij stanične kulture i isperite stanice 1-2 puta PBS-om, medijem bez seruma ili drugim puferima kako biste uklonili ostatke seruma.

2. Dodajte odgovarajuću količinu otopine za probavu rekombinantnog tripsina da pokrijete stanice i probavite pod mikroskopom kako biste promatrali, vrijeme probave većine stanica između 30s-3min; za neprobavljive stanice, može se staviti u inkubator stanične kulture na probavu određeno vrijeme (vrijeme probave je samo za referencu, određeno vrijeme probave treba odrediti prema stvarnoj situaciji).

3. Kada stanice pokažu značajno skupljanje ili morfološke promjene, aspirirajte rekonstituirani tripsin digest i dodajte odgovarajuću količinu medija za kulturu stanica koji sadrži serum kako biste prekinuli probavu (ako je stanice teško odvojiti od dna ploče kada se lagano puše s pipetom, to znači da vrijeme probave nije dovoljno i probava se može nastaviti dodavanjem stanične digestije tripsina. Izbjegavajte prekomjerna probava).

4. Prikupite suspenziju stanica u epruvetu za centrifugiranje, centrifugirajte na 800-1200 okr/min 3-5 min, dodajte odgovarajuću količinu medija za kulturu stanica koji sadrži serum (po izboru).

5. Nježno ispuhnite stanice kako biste napravili suspenziju stanica, koja se može koristiti za pasažu ili naknadne pokuse.

1. Ovaj se proizvod može izravno koristiti za probavu stanica na 4 stupnja. Temperatura digestije može se odabrati na sobnoj temperaturi ili u inkubatoru po potrebi, ali nemojte prethodno zagrijavati proizvod izravno na 37 stupnjeva. Ponovni porast i pad temperature ima određeni učinak na aktivnost enzima.

2. Nakon primitka proizvod se može skladištiti u dijelovima prema potrebi; ako je potrebno pohraniti na -20 stupnjeva, izbjegavajte ponovno zamrzavanje i odmrzavanje.

3. Vrijeme probave razlikuje se između staničnih linija ili tkiva, stoga provjerite optimalno vrijeme probave kako biste izbjegli predugu prekomjernu probavu, koja može utjecati na aktivnost i stanje stanica.

4. Ovaj proizvod je aseptičan i spreman za upotrebu, te je testiran na mikoplazmu i endotoksin. Obratite pozornost na aseptičnost tijekom uporabe.

5. Radi vašeg zdravlja i sigurnosti, nosite laboratorijsku kutu i rukavice tijekom rada.

Samo za istraživačku upotrebu!

Popularni tagovi: swe rekombinantna tripsin-edta otopina bez fenol crvenog, Kina swe rekombinantna tripsin-edta otopina bez fenol crvenog proizvođači, dobavljači, tvornica